熒光原位雜交技術(shù)應(yīng)用
日期:2025-06-11 20:36
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摘要:
熒光原位雜交技術(shù)應(yīng)用
熒光原位雜交技術(shù)在基因定性、定量,整合、表達(dá)等方面的研究中頗具優(yōu)勢(shì),目前已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于遺傳病診斷、病毒感染分析、產(chǎn)前診斷、腫瘤遺傳學(xué)和基因組研究等許多領(lǐng)域,在臨床檢驗(yàn)、教學(xué)和研究等方面扮演著重要的角色。
熒光原位雜交技術(shù)在基因定性、定量,整合、表達(dá)等方面的研究中頗具優(yōu)勢(shì),目前已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于遺傳病診斷、病毒感染分析、產(chǎn)前診斷、腫瘤遺傳學(xué)和基因組研究等許多領(lǐng)域,在臨床檢驗(yàn)、教學(xué)和研究等方面扮演著重要的角色。
基因(或DNA片段)染色體定位和基因圖譜繪制
熒光原位雜交目前應(yīng)用的基因定位的主要方法是FISH。分離到的DNA序列直接通過FISH,同時(shí)采用多種顏色熒光素的標(biāo)記探針,結(jié)合中期染色體和間期細(xì)胞方面的信息,可快速確定一-系列DNA序列之間的相互次序和距離,完成基因制圖。用不同顏色炎光索標(biāo)記2個(gè)不同的DNA鏈,而且他們?cè)谌旧w上的距離大于1Mbp時(shí),可以依據(jù)不同探針信號(hào)的排列關(guān)系分辨他們?cè)谌旧w上的順序。
若采用5-溴脫氧尿嘧啶( 5-Burd )處理細(xì)胞,能夠獲得高分辨顯帶的染色體,提高DNA鏈標(biāo)記到染色體上的分班能力。如使用間期細(xì)胞,2個(gè)DNA鏈的距離可以縮短至50kb,這個(gè)間距是染色體上分辨距離的1/20,不同探針的次序可以通過測(cè)量間期細(xì)胞的距離來確定。確定DNA鏈在染色體上的精細(xì)位置適用于檢在某些特殊的染色休易位和缺失。標(biāo)記同一-DNA鏈與不同種屬細(xì)胞的染色體雜交,可以找出不同種屬之間的同源基因以及基因在染色體上的位置,從而了解種屬之間的進(jìn)化關(guān)系。